产品展示/PRODUCTS SHOW
猪繁殖与呼吸综合征病毒NADC30株荧光RT-PCR检测试剂盒
产品名称：猪繁殖与呼吸综合征病毒NADC30株荧光RT-PCR检测试剂盒
规 格：50T/盒
反应体积：25μL
试剂类型：液体
【预期用途】
本试剂盒适用于检测猪生殖与呼吸综合症病毒美洲型NADC30株(NADC30-like PRRSV)，用于猪生殖与呼吸综合症病毒美洲型NADC30株(NADC30-like PRRSV)感染的辅助诊断，其检测结果仅供参考。本产品不提供活体样品做阳性对照，仅提供人工合成的特异性DNA//片段标准品作为阳性对照，仅限于业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗用途。
【储存、有效期】
-20℃±5℃，避光保存、运输、反复冻融少于7次，有效期12个月。
【技术原理】
采用TaqMan一步法荧光定量RT-PCR技术，结合特异性扩增引物对目的基因进行体外扩增，本试剂盒具有灵敏性高、特异性强、反应时间短等优点，操作简便，污染概率低等特点。
【使用方法】
一、试剂准备（在试剂准备区进行）
1. 取出包装盒中的各组分，室温放置，待其完全融化，混匀后备用。
2. 根据待测样本、阴性对照、阳性对照的数量，按下表1单反应体系配制方法，取相应量的试剂，充分混匀成PCR-Mix，按照20 μL/反应分装到PCR反应管中，瞬时离心后备用。
表1：单反应体系配制方法
| 试剂 | 反应液 | 混合酶 |
| 用量 | 19 μL | 1 μL |
二、样本准备（在样本准备区进行）
1. 使用商品化的病毒核酸提取试剂盒，参照说明书进行操作，提取好的核酸样本如不能立即检测，建议-70℃以下保存。
2. 取出样本后混匀，将阴性对照、待测样本、阳性对照各5 μL加入到PCR反应管中混匀。
3. 盖上管盖，2000 rpm离心30。
4. 将PCR反应管转移到扩增区进行上机。
三、PCR（在核酸扩增区进行）
1. 将上述PCR反应管按照实验布局依次放入PCR仪对应检测孔内，并记录顺序。
2. 按表2设置PCR扩增循环参数。
表2：PCR扩增相关参数
| 体系 | 反应体系设为25 μL | ||
| 信号采集 | 选择FAM通道检测H5亚型； 选择CY5通道检测H7亚型； 选择ROX通道检测H9亚型。 | ||
| PCR 反应 条件 | 阶段 | 条件 | 循环数 |
| 逆转录 | 50℃：30 min | 1 | |
| 预变性 | 95℃：5 min | 1 | |
| PCR | 95℃：15 sec | 45 | |
| 60℃：30 sec （此阶段结束时采集荧光信号） | |||
【结果分析】
表3：结果分析表
| 实验成立 条件 | 阴性对照 | 三通道Ct＞38或者No Ct，线形为直线或轻微斜线，无指数增长期。 |
| 阳性对照 | 三通道Ct≤30且出现典型的S型扩增曲线。 | |
| 样本结果 判定标准 | H5亚型 阳性 | FAM通道Ct≤35且出现典型的S型扩增曲线。 |
| H7亚型 阳性 | CY5通道Ct≤35且出现典型的S型扩增曲线。 | |
| H9亚型 阳性 | ROX通道Ct≤35且出现典型的S型扩增曲线。 |
| 结果可疑 | 任一通道35＜Ct≤38，建议复测，复测结果仍为可疑，且出现明显指数增长，判为阳性。否则为阴性。 |
| 结果阴性 | Ct＞38或者No Ct，线形为直线或轻微斜线，无指数增长期。 |
【注意事项】
1. 使用本试剂盒的实验室，应严格按照国家有关基因扩增检验实验室管理规范进行管理。
2. 各区域物品均为用，不得交叉使用，以免污染。检测结束后，应立即对工作台进行清洁消毒。
3. 吸取反应液时，应尽量避免产生气泡。上机，应注意检查各反应管是否盖紧，以免液体蒸发造成结果不准确。
4. 检测过程中使用过的吸头，应直接打到盛有10%次氯酸的废液缸内，检测结束的PCR反应管，切忌开盖，并与其他废弃物品一同灭菌后丢弃。
5. 工作台及各种实验用品应定期用10%次氯酸、75%酒精或紫外灯进行消毒。
6. 试剂使用应在常温下充分融化并混匀。不同批号的试剂请勿混用，并在有效期内使用。
【储存条件与有效期】
试剂盒应置于-20℃冷冻避光贮存；
试剂盒保存有效期为12个月；
试剂盒反复冻融次数不宜超过5次。
原创作者：上海岑特生物科技有限公司
在线留言/MESSAGE
在线咨询，尊敬的客户您好，我们会尽快回复您的咨询！
| 您感兴趣的产品* | 您还没有输入您感兴趣的产品 | |
| 您的单位* | 您还没有输入您的单位 | |
| 联系人* | 您还没有输入联系人 | |
| 联系电话* | 您还没有输入联系电话 | |
| 详细地址 | ||
| 常用邮箱* | 您输入的邮箱格式不正确 | |
| 请输入您对我们的意见或建议* | 您还没有输入您对我们的意见或建议 | |
| 验证码* | 您还没有输入验证码 |
温馨提示
1.遵守中华人民共和国有关法律、法规，尊重网上道德，承担一切因您的行为而直接或间接引起的法律责任。
2.请您真实的反映产品的情况,不要捏造、诬蔑、造谣。如对产品有任何疑问,也可以留言咨询。
3.未经本站同意，任何人不得利用本留言簿发布个人或团体的具有广告性质的信息或类似言论。
相关文章/ARTICLES
联系我们/CONTACT US
联系人：王宇豪
电 话：021-58993001
手 机：15121072253
地 址：上海市嘉定区曹安公路5588号
邮 编：
传 真：021-50760790
邮 箱：shyuanmusw@163.com
产品分类/CLASS
