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质粒表达载体按进入受体细胞的类型分类

阅读次数:350   发布时间:2023/1/31 11:21:28

 质粒表达载体具有克隆载体的基本元件还具有转录/翻译所必需的DNA顺序的载体。天然存在的野生型质粒由于分子量大、拷贝数低、单一酶切位点少、遗传标记不理想等缺陷,不能满足克隆载体的要求,因此往往需要以多种野生型质粒为基础进行人工构建。
 
质粒表达载体按进入受体细胞的类型可分为:
原核载体;真核载体;穿梭载体指在两种宿主生物体内复制的载体分子,因而可以运载目的基因(穿梭往返两种生物之间)。穿梭质粒含原核和真核生物2个复制子,以确保两类细胞中都能扩增。
 
质粒表达载体之质粒的接合转移方法:是细菌遗传物质转移的一个重要方式。在质粒转移过程中,供体菌和受体菌通过结合作用紧密接触,质粒从供体细胞向受体转移,同时进行质粒复制。按能否自主转移,可以将天然存在的质粒分为转移型质粒和非转移型质粒两大类。这里要注意的是,获得质粒的细菌可随之而获得一些生物学特性,如耐药性或产生细菌素的能力等。从环境友好出发,实验室里的废弃菌液,一定要灭过菌才能倒哦。
 
质粒载体按功能可分为这些:
整合质粒:装有整合促进基因及位点 便于外源基因的整合。
探针质粒:装有报告基因 便于启动子等元件的克隆筛选。
高拷贝质粒:突变拷贝数控制基因 拷贝数1000-3000扩增基因。
低拷贝质粒:来自pSC101 拷贝数小于10 表达某些毒性基因。
测序质粒:含有测序通用引物互补序列和多酶接头polylinker。
温敏质粒:在不同温度下表现出拷贝数、整合等不同性质。

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