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简述凝胶层析技术的原理和过程

阅读次数:183   发布时间:2024/4/19 9:48:43

凝胶层析(又叫凝胶过滤或分子筛)凝胶层析是指混和物随流动相流经固定相的层析柱时,混合物中各组分按其分子大小不同而被分类的技术。



1.  原理

凝胶层析的固定相是凝胶。凝胶是一种不带电荷的具有三维空间多孔网状结构的物质,凝胶的每个颗粒内部都具有很多细微的小孔,如同筛子一样。

常用凝胶有琼脂糖凝胶、聚丙烯酰胺凝胶、葡聚糖凝胶等。

葡聚糖凝胶介质是由多聚葡聚糖与环氧绿丙烷交连而成。zui常用的葡聚糖凝胶层析介质是Sephadex G系列,不同型号的凝胶用G表示,G代表交联度,从G10到G100。“G”后面的数字表示每10g干胶的吸水量,可根据待分离混和物分子量大小选用不同“G”值的凝胶。

2.  分离过程:

样品随洗脱液的流动下移

3.  影响凝胶柱层析的主要因素

(1)层析柱的选择与装填

层析柱的大小应根据分离样品量的多少及对分辨率的要求而定。凝胶柱填装后用肉眼观察应均匀、无纹路、无汽泡。

(2)流动相――洗脱液的选择:是含有一定浓度盐的缓冲液,目的是为了防止凝胶可能有吸附作用。其选择主要取决于待分离样品,一般来说只要能溶解洗脱物质,并不使其变性的缓冲液都可用于凝胶层析。

(3)加样量:加样量的多少应根据具体的实验而定:一般分分离时加样量约为凝胶柱床体积的1%-5%,而分组分离时加样量约为凝胶柱床体积的10%-25%.

(4)凝胶再生:葡聚糖凝胶再生使用NaOH(0.2M)和NaCl(0.5M)混合液处理。

我司供应各种凝胶系列产品
产品编号 产品名称
SY2141    葡聚糖凝胶LH-20
SY2142    葡聚糖凝胶LH-60
SY2143    葡聚糖凝胶G-10
SY2144    葡聚糖凝胶G-15
SY2145    葡聚糖凝胶G-25
SY2146    葡聚糖凝胶G-50
SY2147    葡聚糖凝胶G-75
SY2148    葡聚糖凝胶G-100
SY2149    葡聚糖凝胶G-150
SY2149    葡聚糖凝胶G-150
SY2150    葡聚糖凝胶G-200
SY2250    琼脂糖凝胶2B
SY2251    琼脂糖凝胶4B
SY2252    琼脂糖凝胶6B
SY2253    琼脂糖凝胶CL-2B
SY2254    琼脂糖凝胶CL-4B
SY2255    琼脂糖凝胶CL-6B  
SY2256    琼脂糖凝胶4FF
SY2257    琼脂糖凝胶6FF
SY2258    丙烯葡聚糖凝胶S-100
SY2259    丙烯葡聚糖凝胶S-200
SY2260    丙烯葡聚糖凝胶S-300
SY2261    丙烯葡聚糖凝胶S-400
SY2262    丙烯葡聚糖凝胶S-500
SY2263    镍-NTA琼脂糖凝胶6FF
SY2264    蓝色-琼脂糖凝胶6FF
SY2265    蓝色-琼脂糖凝胶CL-6B
SY2266    红色-琼脂糖凝胶6FF
SY2267    DEAE-葡聚糖凝胶A-25
SY2268    DEAE-葡聚糖凝胶A-50
SY2269    QAE-葡聚糖凝胶A-25
SY2270    QAE-葡聚糖凝胶A-50
SY2271    CM葡聚糖凝胶C-25
SY2272    CM葡聚糖凝胶C-50
SY2273    SP-葡聚糖凝胶C-25
SY2274    SP-葡聚糖凝胶C-50
SY2275    DEAE-琼脂糖凝胶FF
SY2276    CM-琼脂糖凝胶FF
SY2277    DEAE-琼脂糖凝胶CL-6B
SY2278    CM-琼脂糖凝胶CL-6B
SY2350    Q-琼脂糖凝胶HP
SY2351    SP-琼脂糖凝胶HP
SY2352    Q-琼脂糖凝胶FF
SY2353    SP-琼脂糖凝胶F
SY2354    DEAE-琼脂糖凝胶FF
SY2356    DEAE-琼脂糖凝胶CL-6B
SY2450    苯基-琼脂糖凝胶6FF
SY2451    苯基-琼脂糖凝胶H.P.
SY2452    苯基-琼脂糖凝胶CL-4B
SY2453    丁基-琼脂糖凝胶4FF
SY2454    丁基-琼脂糖凝胶H.P.
SY2455    丁基-琼脂糖凝胶4B
SY2456    辛基-琼脂糖凝胶4FF
SY2457    辛基-琼脂糖凝胶H.P.
SY2458    辛基-琼脂糖凝胶CL-4B
SY2550    镍-琼脂糖凝胶6FF
SY2551    镍-琼脂糖凝胶H.P.
SY2552    蓝色-琼脂糖凝胶6FF
SY2553    蓝色-琼脂糖凝胶CL-6B
SY2554    红色-琼脂糖凝胶6FF
SY2555    肝素-琼脂糖凝胶6FF
SY2556    肝素-琼脂糖凝胶H.P.
SY2557    谷胱甘肽-琼脂糖凝胶4B
SY2558    谷胱甘肽-琼脂糖凝胶4FF
SY2559    谷胱甘肽-琼脂糖凝胶H.P.
SY2560    胰蛋白酶-琼脂糖凝胶4B
SY2561    苯甲脒-琼脂糖凝胶6B
SY2562    苯甲脒-琼脂糖凝胶4FF
SY2563    ConA-琼脂糖凝胶4B
SY2564    赖氨酸-琼脂糖凝胶4B
SY2565    羧基-琼脂糖凝胶4B
SY2566    明胶-琼脂糖凝胶4FF
SY2567    环氧活化-琼脂糖凝胶6B
SY2568    精氨酸-琼脂糖凝胶4B
SY2650    DEAE 纤维素DE-32
SY2651    DEAE 纤维素DE-52
SY2652    羧甲基纤维素CM-52
SY2664    羧甲基纤维素CM-32

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