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小鼠L苯丙氨酸解氨酶（PAL）ELISA检测试剂盒操作说明书
上海岑特生物详细介绍小鼠L苯丙氨酸解氨酶（PAL）ELISA检测试剂盒操作说明书，规格，适用范围，性能，价格等详情，本司专业销售培养基，抗体，动物血清，进口/国产elisa试剂盒，标准品对照品，化学试剂，实验耗材，染色液，生化试剂盒，酶联免疫试剂，ELISA白介素试剂盒，金标检测试剂盒，为客户提供elisa试剂盒免费代测服务，ELISA种属有大鼠，小鼠，植物，人，马，鱼，鸭，骆驼，牛，猪，兔，猪及其他动物，若有需要，欢迎订购！
小鼠L苯丙氨酸解氨酶（PAL）ELISA检测试剂盒操作说明书产品简介：
别名：小鼠L苯丙氨酸解氨酶(PAL)ELISA kit
供应商：上海岑特
规格：48t/96t
保存：2-8℃
有效期：6个月
库存状态：现货供应。
保 存：2-8℃,避光保存。
适用范围：仅用于科研实验，禁用于临床。
性能:敏感性高，特异性强，重复性。
ELISA试剂盒种属：人、大鼠、小鼠、豚鼠、兔子、猪犬、牛羊、鸡鸭、植物ELISA试剂盒等。
试剂盒检测目的：用于测定血清，血浆及相关液体等样本。例如适合检测包括血清、血浆、尿液、胸腹水、灌洗液、脑脊液、细胞培养上清、组织匀浆等标本。
小鼠L苯丙氨酸解氨酶(PAL)ELISA试剂盒液体类标本：
包括血清、血浆、尿液、胸腹水、脑脊液、细胞培养上清等。
1)血清：
室温血液自然凝固10-20分钟后，离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。
2)血浆：
应根据标本的要求选择EDTA、柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂，混合10-20分钟后，离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。
3)尿液：
用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。胸腹水、脑脊液参照此实行。
4)细胞培养上清：
检测分泌性的成份时，用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/ 分)。仔细收集上清。检测细胞内的成份时，用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液，细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融，以使细胞破坏并 放出细胞内成份。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。
5)组织标本：
切割标本后，称取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS(PH7.4)，用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。分装后一份待检测，其余冷冻备用。
小鼠L苯丙氨酸解氨酶(PAL)ELISA试剂盒操作流程：
1. 从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条，剩余板条用自封袋密封放回4℃。
2. 设置标准品孔和样本孔，标准品孔各加不同浓度的标准品50μL;
3. 样本孔中加入待测样本50μL;空白孔不加。
4. 除空白孔外，标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗体100μL，用封板膜封住反应孔，37℃水浴锅或恒温箱温育60min。
5. 弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液(350μL)，静置1min，甩去洗涤液，吸水纸上拍干，如此重复洗板5次(也可用洗板机洗板)。
6. 每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。
7. 每孔加入终止液50μL，15min内，在450nm波长处测定各孔的OD值。
小鼠L苯丙氨酸解氨酶(PAL)ELISA检测试剂盒注意事项：
1.标本宜在新鲜时检测。如有细菌污染，菌体中可能含有内源性HRP,也会产生假阳性反应。保存过久可发生聚合在ELISA中可使本底加深。
2.冻结标本溶解后，蛋白质局部浓缩，分布不均，应充分混匀宜轻缓，避免气泡，可上下颠倒混合，不要在混匀器上强烈震荡。
3.浑浊或有沉淀的标本应先离心或过滤，澄清后再检测。
4.反复冻融会使蛋白效价降低，所以代测样本如需保存作多次检测，宜少量分装冰存。
小鼠L苯丙氨酸解氨酶(PAL)ELISA检测试剂盒组织结构：
1、 血清：操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后，1000×g离心23分钟将血红细胞迅速小心地分离。
2、 血浆：EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心60分钟去除颗粒。
3、 细胞上清液：1000×g离心32分钟去除颗粒和聚合物。
4、 组织匀浆：将组织加入适量生理盐水捣碎。1000×g离心33分钟，取上清液。
5、 保存：如果样品不立即使用，应将其分成小部分-70℃保存，避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒，检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
小鼠L苯丙氨酸解氨酶（PAL）ELISA检测试剂盒操作说明书 包含以下各组分：
(1)结合物及标本的稀释液;
(2)洗涤液，在板式ELISA中，常用的稀释液为含0.05%吐温20磷酸缓冲盐水;
(3)酶标记的抗原或抗体(结合物);
(4)酶的底物;
(5)阴性对照品和阳性对照品(定性测定中)，ELISA试剂盒参考标准品和控制血清(定量测定中);
(6)已包被抗原或抗体的固相载体(免疫吸附剂);
ELISA试剂盒准备：
试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡后方可使用。
1. 标准品复溶：试剂盒提供6管标准品，每管已标定浓度，并且冻干。实验前在每个标准品管中加入0.5mL样本稀释液，盖好后静置10分钟以上，然后反复颠倒/搓动助其溶解，使其恢复为每个标准品管身标注的浓度。
2. 20×洗涤缓冲液的稀释：蒸馏水按1：20稀释，即1份20×洗涤缓冲液加19份蒸馏水。
原创作者：上海岑特生物科技有限公司
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