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NAD激酶（NADK）测试盒 微量法
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详细信息
中文名称：NAD激酶（NADK）测试盒 微量法
测定方法：微量法
测定规格：管/48样
保存条件：低温避光保存
有 效 期：６个月
注 意 ：正式测定之选择2-3个预期差异大的样本做预测定。
样本测定的准备：
1、细菌、细胞或组织样品的制备：
细菌或培养细胞：先收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；按照细菌或细胞数量（104个）：提取液体积（mL）为500~0：1的比例（建议500万细菌或细胞加入1mL提取液），超声波破碎细菌或细胞（冰浴，功率20％或200W，超声3s，间隔10s，重复30次）；8000g 4℃离心10min，取上清，置冰上待测。
组织：按照组织质量（g）：提取液体积(mL)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g组织，加入1mL提取液），进行冰浴匀浆。8000g 4℃离心10min，取上清，置冰上待测。
2、血清（浆）样品：直接检测。
活性计算：
a.用微量石英比色皿测定的计算公式如下
1、血清（浆）NADK活力的计算:
单位的定义：每mL血清（浆）每分钟生成1 nmol的NADP定义为一个酶活力单位。
NADK（nmol/min/mL）＝[ΔA×V反总÷（ε×d）×109]÷V样÷T=53.59×ΔA
2、组织、细菌或细胞中NADK活力的计算:
（1）按样本蛋白浓度计算：
单位的定义：每mg组织蛋白每分钟生成1 nmol NADP定义为一个酶活力单位。
NADK（nmol/min /mg prot）＝[ΔA×V反总÷（ε×d）×109]÷(V样×Cpr) ÷T=53.59×ΔA÷Cpr
（2）按样本鲜重计算：
单位的定义：每g组织每分钟生成1 nmol NADP定义为一个酶活力单位。
NADK（nmol/min /g 鲜重）＝[ΔA×V反总÷（ε×d）×109]÷(W× V样÷V样总) ÷T=53.59×ΔA÷W
（3）按细菌或细胞密度计算：
单位的定义：每1万个细菌或细胞每分钟生成1 nmol NADP定义为一个酶活力单位。
NADK（nmol/min /104 cell）＝[ΔA×V反总÷（ε×d）×109]÷(500×V样÷V样总) ÷T=0.107×ΔA
V反总：反应体系总体积，1×10-4 L；ε：NADPH摩尔消光系数，6.22×103 L / mol /cm；d：比色皿光径，1cm；V样：加入样本体积，0.02 mL；V样总：加入提取液体积，1 mL；T：反应时间，15 min；Cpr：样本蛋白质浓度，mg/mL；W：样本质量，g；500：细菌或细胞总数，500万。
本产品仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的，不可用于人类或动物的临床诊断或治疗，非药用，非食用。
测定方法：微量法
测定规格：管/48样
保存条件：低温避光保存
有 效 期：６个月
注 意 ：正式测定之选择2-3个预期差异大的样本做预测定。
样本测定的准备：
1、细菌、细胞或组织样品的制备：
细菌或培养细胞：先收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；按照细菌或细胞数量（104个）：提取液体积（mL）为500~0：1的比例（建议500万细菌或细胞加入1mL提取液），超声波破碎细菌或细胞（冰浴，功率20％或200W，超声3s，间隔10s，重复30次）；8000g 4℃离心10min，取上清，置冰上待测。
组织：按照组织质量（g）：提取液体积(mL)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g组织，加入1mL提取液），进行冰浴匀浆。8000g 4℃离心10min，取上清，置冰上待测。
2、血清（浆）样品：直接检测。
活性计算：
a.用微量石英比色皿测定的计算公式如下
1、血清（浆）NADK活力的计算:
单位的定义：每mL血清（浆）每分钟生成1 nmol的NADP定义为一个酶活力单位。
NADK（nmol/min/mL）＝[ΔA×V反总÷（ε×d）×109]÷V样÷T=53.59×ΔA
2、组织、细菌或细胞中NADK活力的计算:
（1）按样本蛋白浓度计算：
单位的定义：每mg组织蛋白每分钟生成1 nmol NADP定义为一个酶活力单位。
NADK（nmol/min /mg prot）＝[ΔA×V反总÷（ε×d）×109]÷(V样×Cpr) ÷T=53.59×ΔA÷Cpr
（2）按样本鲜重计算：
单位的定义：每g组织每分钟生成1 nmol NADP定义为一个酶活力单位。
NADK（nmol/min /g 鲜重）＝[ΔA×V反总÷（ε×d）×109]÷(W× V样÷V样总) ÷T=53.59×ΔA÷W
（3）按细菌或细胞密度计算：
单位的定义：每1万个细菌或细胞每分钟生成1 nmol NADP定义为一个酶活力单位。
NADK（nmol/min /104 cell）＝[ΔA×V反总÷（ε×d）×109]÷(500×V样÷V样总) ÷T=0.107×ΔA
V反总：反应体系总体积，1×10-4 L；ε：NADPH摩尔消光系数，6.22×103 L / mol /cm；d：比色皿光径，1cm；V样：加入样本体积，0.02 mL；V样总：加入提取液体积，1 mL；T：反应时间，15 min；Cpr：样本蛋白质浓度，mg/mL；W：样本质量，g；500：细菌或细胞总数，500万。
本产品仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的，不可用于人类或动物的临床诊断或治疗，非药用，非食用。
原创作者：上海岑特生物科技有限公司
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