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抗A、抗B血型定型试剂(单克隆抗体)操作规程
阅读次数:293 发布时间:2024/4/22 10:20:54
【简介】
抗A,抗B血型定型试剂(单克隆抗体)用A血型单克隆抗体或B血型单克隆抗体配制而成,用于鉴定人ABO血型。单克隆抗体是由单一B细胞克隆产生的高度均一、仅针对某一特定抗原表位的抗体。通常采用杂交瘤技术来制备,杂交瘤(hybridoma)抗体技术是在细胞融合技术的基础上,将具有分泌特异性抗体能力的致敏B细胞和具有无限繁殖能力的骨髓瘤细胞融合为B细胞杂交瘤。
【用途】 本试剂盒供鉴定人血型用,具有快速简便、灵敏度高、特异性强、重复性好等优点。
【测定原理】 利用单克隆抗A、抗B抗体和相应的红细胞抗原发生特异性凝集反应的原理。能和抗A抗体发生凝集反应,而不和抗B抗体反应的为A型;和抗B抗体发生凝集反应而不和抗A抗体发生反应的为B型;同时能和抗A及抗B抗体发生凝集反应为AB型;而不被抗A及抗B抗体凝集的则为O型。
【测定步骤】
1.被检者的抗凝血,用生理盐水洗涤1-2次后,取压积红细胞配成5%的生理盐水悬液。
2.取小试管5支,分别标明抗A、抗B、A细胞、B细胞、O细胞。在抗A管内加1滴抗A试剂,抗B管内加1滴抗B试剂,A细胞、B细胞、O细胞管内各加被检血清1滴,然后在抗A、抗B管内各加被检红细胞1滴,A细胞管内加1滴5% A型红细胞悬液,B细胞管内加1滴5% B型红细胞悬液,O细胞管内加1滴5% O型红细胞悬液。
3.混匀,离心1000转/分,1分钟。然后判断结果。
【结果判断】
按下表判别被检者血型
被检者血型 正定型 反定型
抗A 抗B A细胞 B细胞 O细胞
A + - - + -
B - + + - -
O - - + + -
AB + + - - -
“+”表示凝集,“-”表示不凝集
【注意事项】
1.本试剂可用平板法(玻片法)操作,步骤如下:本试剂与受检者全血或10%红细胞生理盐水悬液在玻片上按1:1比例混合,摇匀,3分钟按照有无凝集判定结果。
2.好血型试验与细胞试验同时进行。
3.单克隆抗体试剂发生定型疑问时,用人血清型试剂来裁决。
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