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细胞培养实验中对支原体污染的预防措施

阅读次数：300 发布时间：2023/6/2 10:52:40

细胞培养实验室发生支原体污染的风险较高。支原体天然存在于周围空气（气溶胶形式）、人的体表（携带和隐藏）以及未彻底消毒的器物表面，而细胞培养基中由于含有血清，营养丰富，很容易导致支原体的快速繁殖。

支原体的污染肉眼不易察觉，直到严重的阶段才会出现培养基变色、细胞异常等情况。支原体可造成细胞代谢改变，基因表达谱发生变化，从而严重干扰实验进程。因此，在细胞培养过程中，定期监测是否存在支原体污染，及时预防支原体污染是每个科研人员的工作。

为防止支原体污染细胞，可采取以下措施：

1、保持无菌技术：始终在无菌环境中工作，使用适当的个人防护设备，例如手套和实验室外套，定期对实验室进行清洁，可以使用支原体祛除试剂：Mycoplasma-off，无需配制，即喷即用；Water Shield可用于水槽、水浴锅等处的支原体祛除和预防。保持良好的实验室卫生：保持实验室清洁和维护良好，包括设备和表面。

2、使用无支原体细胞系：建议从信誉良好的供应商提供的无支原体细胞系开始。

3、定期检测支原体：定期检测细胞培养物是否存在支原体污染至关重要。可以使用各种测试，包括基于 PCR 的方法、荧光染色和 ELISA。

4、避免交叉污染：保持细胞培养分离，避免交叉污染。正确标记和处理细胞系。

通过采取这些措施，可以降低支原体污染的风险，并保持基于细胞的实验的完整性和可靠性。