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核酸提取必备小磁珠的分类介绍

阅读次数：384 发布时间：2023/5/23 11:08:38

分子诊断是以核酸作为检测对象，主要应用于临床各科的诊断中，如肿瘤、感染、遗传等各方面，而核酸提取是分子诊断实验的“步”。近年来，磁珠已成为核酸提取过程中常用的工具。

磁珠的概念和分类

根据不同的表面处理与标记，可将磁珠分成各种不同的应用类型：

TiO2磷酸化多肽富集磁珠

磁珠表面覆盖有一层TiO2材料，可以选择性的与磷酸化的氨基酸残基：丝氨酸(Ser)、酪氨酸(Tyr)、苏氨酸(Thr)结合，而与酸性的氨基酸残基的非特异性结合小。与传统的IMAC技术相比，其灵敏度提高了1000倍，富集后磷酸化蛋白的质谱检出限达100 fmol。

谷胱甘肽(GSH)磁珠

该磁珠表面包被有琼脂糖，并偶联有谷胱甘肽，可以特异性的与谷胱甘肽-S-转移酶(GST)结合，因而可用于纯化带有GST标签的重组蛋白。TALON"磁珠。TALON磁珠的原理是基于采用Co离子的固定化金属离子亲和技术(IMAC)，可用于纯化带有组氨酸标签(6xHis)的重组蛋白。

Protein A和Protein G磁珠

带有Protein A或Protein G基团的磁珠，可广泛应用于IgG的纯化、免疫沉淀(IP)和免疫共沉淀(Co-IP)等。

硅质膜磁珠

这是一类早出现的产品，广泛应用于DNA、RNA的纯化。其原理类似于使用硅质膜的离心柱，磁珠在高盐条件下与核酸结合，而在低盐环境下被洗脱，可用于全血、组织、细菌、病毒、植物等的核酸纯化。

反相RPC磁珠

类似于反向层析的原理，可用于多肽的分离纯化。Jimenez等使用KingFisher96和Dynabead? RPC 18磁珠仅需20min就可以平行处理96个样品，用于与疾病相关的血清中肽段表达谱的研究。

ChargeSwitch磁珠

ChargeSwitch磁珠的原理类似于离子交换技术，磁珠在pH & 6.5的缓冲液中带正电，可与带负电的核酸结合；在pH< 8.5的缓冲液中磁珠带负电，使得之吸附的核酸从磁珠上释放。ChargeSwitch磁珠可在KingFisher平台上完美使用。

核酸提取新兴力量——磁珠法

自沃森、克里克的DNA双螺旋模型诞生，生物学进入到了一个全新的时代，在生物学界言必DNA，论必中心法则，对DNA的提取成为生物医药域甚至农林牧渔等域内所有学科科学研究的基础，随着基因诊断、转基因食品检测、个性化医疗等的快速发展，现在的核酸提取技术已经不能够满足当生物技术的需要，急需能够高通量、自动化的核酸提取方法。在这种背景下，磁珠法核酸提取应运而生。

核酸提取法的原理

核酸结合到磁珠上主要依靠静电作用、疏水作用和氢键作用。细胞或组织在裂解液作用下，其中的DNA/RNA被释放出来。此时经过表面修饰的超顺磁性氧化硅纳米磁珠即与核酸进行“特异性结合”，形成“核酸-磁珠复合物”。然后在外加磁场的作用下，复合物即分离出来。后经过洗脱液洗去非特异性吸附的杂志、去盐、纯化后，即得到欲提取的核酸物质。

磁珠法核酸提取的优势

随着基因检测、个性化给药、产诊断等的普及，在生物行业各域都追求高通量、自动化的天，传统DNA提取方法的局限愈来愈明显，而磁珠法DNA提取的优势则愈来愈明显：能够实现自动化、大批量操作；操作简单、用时短；不使用传统方法中的苯、氯仿等有毒试剂，安全无毒完全符合现代环保理念；与核酸的特异性结合使得提取的核酸纯度高、浓度大。

磁珠法提取DNA试剂盒要比传统的方法（Chelex100 法、有机法、二氧化硅法、盐析法等）更为简单、方便，转移离心管的次数较少，不易污染等。岑特生物可为您提供健全的全自动核酸提取实验方案！