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岑特分享:动植物细胞大量培养的培养方法

阅读次数:342   发布时间:2023/4/4 11:16:56

  大量培养动物细胞的方法可分为两种:

①悬浮培养,淋巴细胞和肿瘤细胞等能在液体培养基中悬浮生长。悬浮培养系统,工业放大容易,成本低,不易受污染,可在带螺旋桨或平桨搅拌的通用发酵罐中进行。

②大多数动物细胞需要附着在一定的固定表面上才能增殖,因此称单层培养。单层培养的突出问题是提供细胞生长所需的表面积。迄为止应用广泛的是滚瓶法,滚瓶是平放的玻璃瓶,内盛培养基,细胞在其内壁上附着生长,随着瓶子滚动细胞间歇地接触空气和培养基。此外,有效地提供比表面积(表面积/培养基体积)的是微珠法。微珠的直径为40~250μm,当1mg微珠悬浮在1ml培养基上时,能提供的表面积大于5cm2。另一种能提供较大的比表面积的载体为中空纤维,一般结构是把纤维管束装置在圆筒内,培养基一般在管间流动,细胞在管内外壁表面上生长,气体可通过中空纤维管扩散至培养基中。

如何判断一种细胞的生存状态好坏

贴壁细胞在生长状态良好时,细胞均质而透明,细胞内颗粒少,看不到空泡,细胞边缘清楚,培养基内看不到悬浮的细胞和碎片,培养液清澈透明。

  大量培养动物细胞的方法可分为两种:

①悬浮培养,淋巴细胞和肿瘤细胞等能在液体培养基中悬浮生长。悬浮培养系统,工业放大容易,成本低,不易受污染,可在带螺旋桨或平桨搅拌的通用发酵罐中进行。

②大多数动物细胞需要附着在一定的固定表面上才能增殖,因此称单层培养。单层培养的突出问题是提供细胞生长所需的表面积。迄为止应用广泛的是滚瓶法,滚瓶是平放的玻璃瓶,内盛培养基,细胞在其内壁上附着生长,随着瓶子滚动细胞间歇地接触空气和培养基。此外,有效地提供比表面积(表面积/培养基体积)的是微珠法。微珠的直径为40~250μm,当1mg微珠悬浮在1ml培养基上时,能提供的表面积大于5cm2。另一种能提供较大的比表面积的载体为中空纤维,一般结构是把纤维管束装置在圆筒内,培养基一般在管间流动,细胞在管内外壁表面上生长,气体可通过中空纤维管扩散至培养基中。

如何判断一种细胞的生存状态好坏

贴壁细胞在生长状态良好时,细胞均质而透明,细胞内颗粒少,看不到空泡,细胞边缘清楚,培养基内看不到悬浮的细胞和碎片,培养液清澈透明。

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