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高氏1号培养基制备的操作步骤

阅读次数：435 发布时间：2023/3/30 11:37:39

　　高氏1号培养基制备的操作步骤

　　1、称量和溶化按配方先称取可溶性淀粉，放入小烧杯中，并用少量冷水将淀粉调成糊状，再加入少于所需水量的沸水中，继续加热，使可溶性淀粉完全溶化。然后再称取其他各成分，并依次溶化，对微量成分FeSO4 ．7 H2 O可先配成高浓度的贮备液，按比例换算后再加入。待所有试剂完全溶解后，补充水分到所需的总体积。配制固体培养基时，将称好的琼脂放入已溶的试剂中，在加热融化，后补充所损失的水分。

　　2、调pH 用试纸测培养基的原始PH,如果偏酸，用滴管向培养基中加入1mol/LNaOH,边滴边搅拌，并随时用pH试纸测其pH,直至pH达7.6。反之，用1mol/LHCI进行调节。

　　3、分装和加塞将配制的培养基分装入试管内，在试管口或锥形瓶口上塞上棉塞。

　　4、包扎加塞后，将全部试管用麻绳捆好，再在棉塞外包一层牛皮纸，其外再用一根麻绳扎好。用记号笔注明培养基名称、组别、配制日期。

　　5、灭菌将上述培养基以1210C,20min,0.103MPa高压蒸汽灭菌。

　　6、搁置斜面将灭菌的试管培养基冷却至500C左右，将试管口端搁在玻璃棒上。斜面的斜度要适当，使斜面的长度约为管长 1/3。

　　7、无菌检查将灭菌培养基放入37℃的培养箱中培养24～28h，以检查灭菌是否彻底。和改良的差别就在于有没有FeSO4· 7H2O 高氏常常配完后变成褐色也是由于Fe2+氧化为Fe3+的关系，所以常常有人用螯合的FeSO4，防止氧化。