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岑特简述特异性IgG抗体的四种技术
阅读次数:367 发布时间:2023/3/13 11:18:35
特异性IgG抗体技术都有什么?
1.盐析法
多采用硫酸铵盐析法或硫酸钠盐析法。
2.凝胶过滤法
蛋白质分子量不同,通过凝胶介质时的洗脱速度不同。血清蛋白的分分离常用该法。按分子大小可分为3组:第1组:IgM和一些脂蛋白;第2组:IgG和较少量的IgA、IgD、IgE等;第3组:白蛋白、血清黏蛋白、转铁蛋白等。该法过滤条件温和,不影响IgG活性。常结合盐析法提取IgG。
3.离子交换层析法 常用的离子交换剂是DEAE纤维素。该法可获得较纯的IgG,且不影响抗体活性。
4.亲和层析法 将纯化抗原制成亲和层析柱,抗血清通过层析柱时,IgG被层析柱吸附。然后改变洗脱条件,使IgG从层析柱上解离。
抗体产生的规律和意义
1、初次应答
抗原初次进入机体后,经一定的潜伏期才能产生浆细胞并合成和分泌抗体。在潜伏期,抗原被识别和加工,此期的特征是细胞增殖与分化,持续的时间与抗原的性质及进入机体的途径有关,例如菌苗经5-9d,血液中就有抗菌抗体出现;而类毒素则需2-3周后才合成抗毒素。潜伏期之后,抗体浓度呈对数增长,进入对数增长期。继而经历了稳定状态和衰退期,抗体水平迅速降低。上述各期的持续时间长短都与抗原性质有密切关系。
一般来讲,初次应答所产生的抗体量不多,持续时间也短。td抗原刺激机体可产生数种类型的免疫球蛋白,如在预防接种或自然感染后,后出现的是igm,其消失也快,在血中字持续数周至数日。其次出现的是igg,在igm接近消失时,igg达高峰阶段,在血中持续时间较长。iga出现晚,常在igm和igg出现两周以至1-2月后才能在血中测出,其含量也低,但持续时间亦较长。
2、再次应答
在次接受抗原刺激使机体产生一定量抗体后,数日、数月乃至数年再次接种相同抗原,开始时原抗体量稍有下降,称为负相期。可能是由于一部分原有的抗体被再次进入的抗原所结合;从而暂减低了抗体,但短期内抗体量迅速增加,可比原来抗体量高数倍至数十倍,以igg为主,在体内持续时间也长。igm很少增加。
回忆反应是再次应答的特殊形式,发生在机体对抗原初次应答产生的抗体消失后,再次接触抗原物质,使已消失的抗体再度出现,并迅速达高峰。这是由于原刺激在体内留下的免疫记忆细胞保留了原来的抗原信息。若后来刺激的抗原与初次相同(完全相同或仅载体决定蔟相同),则为特异性回忆反应。非特异性回忆反应系指第二次接触的抗原与初次不同,所引起的抗体上升是短暂的,短期内即复下降。
上述规律在疾病的预防和诊断中具有重要意义。例如,初次接种疫苗须在疾病流行数周进行,并一般应接种2次以上;应用血清学试验诊断传染病时,需在疾病初期和晚期采两份血清,以动态观察,若第二次血清抗体水平比次高4倍以上者,有诊断意义。
1.盐析法
多采用硫酸铵盐析法或硫酸钠盐析法。
2.凝胶过滤法
蛋白质分子量不同,通过凝胶介质时的洗脱速度不同。血清蛋白的分分离常用该法。按分子大小可分为3组:第1组:IgM和一些脂蛋白;第2组:IgG和较少量的IgA、IgD、IgE等;第3组:白蛋白、血清黏蛋白、转铁蛋白等。该法过滤条件温和,不影响IgG活性。常结合盐析法提取IgG。
3.离子交换层析法 常用的离子交换剂是DEAE纤维素。该法可获得较纯的IgG,且不影响抗体活性。
4.亲和层析法 将纯化抗原制成亲和层析柱,抗血清通过层析柱时,IgG被层析柱吸附。然后改变洗脱条件,使IgG从层析柱上解离。
抗体产生的规律和意义
1、初次应答
抗原初次进入机体后,经一定的潜伏期才能产生浆细胞并合成和分泌抗体。在潜伏期,抗原被识别和加工,此期的特征是细胞增殖与分化,持续的时间与抗原的性质及进入机体的途径有关,例如菌苗经5-9d,血液中就有抗菌抗体出现;而类毒素则需2-3周后才合成抗毒素。潜伏期之后,抗体浓度呈对数增长,进入对数增长期。继而经历了稳定状态和衰退期,抗体水平迅速降低。上述各期的持续时间长短都与抗原性质有密切关系。
一般来讲,初次应答所产生的抗体量不多,持续时间也短。td抗原刺激机体可产生数种类型的免疫球蛋白,如在预防接种或自然感染后,后出现的是igm,其消失也快,在血中字持续数周至数日。其次出现的是igg,在igm接近消失时,igg达高峰阶段,在血中持续时间较长。iga出现晚,常在igm和igg出现两周以至1-2月后才能在血中测出,其含量也低,但持续时间亦较长。
2、再次应答
在次接受抗原刺激使机体产生一定量抗体后,数日、数月乃至数年再次接种相同抗原,开始时原抗体量稍有下降,称为负相期。可能是由于一部分原有的抗体被再次进入的抗原所结合;从而暂减低了抗体,但短期内抗体量迅速增加,可比原来抗体量高数倍至数十倍,以igg为主,在体内持续时间也长。igm很少增加。
回忆反应是再次应答的特殊形式,发生在机体对抗原初次应答产生的抗体消失后,再次接触抗原物质,使已消失的抗体再度出现,并迅速达高峰。这是由于原刺激在体内留下的免疫记忆细胞保留了原来的抗原信息。若后来刺激的抗原与初次相同(完全相同或仅载体决定蔟相同),则为特异性回忆反应。非特异性回忆反应系指第二次接触的抗原与初次不同,所引起的抗体上升是短暂的,短期内即复下降。
上述规律在疾病的预防和诊断中具有重要意义。例如,初次接种疫苗须在疾病流行数周进行,并一般应接种2次以上;应用血清学试验诊断传染病时,需在疾病初期和晚期采两份血清,以动态观察,若第二次血清抗体水平比次高4倍以上者,有诊断意义。
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