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辐照后的血清对细胞培养实验有影响吗
阅读次数:371 发布时间:2023/3/3 11:46:31
血清为细胞正常生长提供必要的营养成分,而血清也是很容易受到外界因素影响的,所以有些会对血清采取钴60γ射线照射也就是我们所谓的辐照血清。那么血清被辐照后会对本身产品品质影响吗?下面岑特为大家解惑。
辐照型血清是将正常血清经过三次无菌过滤后再用钴-60辐射灭菌制得的血清。辐照血清是细胞培养中重要的天然培养基,它具有促进细胞增殖和诱导细胞分化等的生物学功能其质量的好坏直接影响着生物制品的安全性。
早在2004年之,西北民族大学生命科学与工程学院的研究人员就用已知大肠杆菌噬菌体为阳性的同批新生牛血清进行过测试。他们选择了一系列不同的辐照剂量,具体为4、8、12、18、24、28、32、40、44、48kGy(所用剂量率为4.37Gy/min),检测了新生牛血清辐照后的总蛋白含量,发现其总蛋白含量没有显著变化。他们又检查了辐照后的大肠杆菌噬菌体。发现在辐射剂量≥8kGy时,能完全杀灭大肠杆菌噬菌体。
他们还检测了辐照后血清的促细胞生长效应。他们把血清按10%比例添加到MEM中。在96孔板中,细胞培养接种浓度为1X104个/ml,每孔加0.2ml。结果发现,辐照剂量<16kGy时,辐照后的新生牛血清和辐照比,Vero细胞的大增殖浓度无显著性差异(P>0.05)。在辐照剂量<24kGy时,Vero细胞的倍增时间也无显著性差异(P>0.05)。但辐照剂量>24kGy时,Vero细胞的倍增时间则明显延长1。
血清功能:
1:提供对维持细胞指数生长的激素,基础培养基中没有或量很少的营养物,以及主要的低分子营养物。
2:提供结合蛋白,能识别维生素、脂类、金属和其他激素等,能结合或调变它们所结合的物质活力。
3:是细胞贴壁、铺展在塑料培养基质上所需因子来源。
4:起酸碱度缓冲液作用。
5:提供蛋白酶抑制剂,使在细胞传代时使剩余胰蛋白酶失活,保护细胞不受伤害。应用适用于正常封闭与增殖旺盛的常规细胞系的培养等。
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