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免疫荧光染色的染料需具备的条件

阅读次数：358 发布时间：2022/11/1 11:19:57

用于免疫荧光染色的染料需具备以下几个条件：

荧光染料应有较高的量子产额和消光系数；

荧光染料对488nm的激发光波长有较强的吸收；

发射光波长与激发光波长之间应有较大的波长差；

容易与被标记的单克隆抗体结合而不影响抗体自身的特异性。

1.异硫氰酸荧光素（FITC）：可产生亮绿色荧光。FITC是免疫荧光标记常用的荧光探针。

2.德州红：与生物素偶联的抗体有很强的亲和力，产生红色荧光。

3.藻胆蛋白类：主要包括藻红蛋白（PE）、藻青蛋白（PC）、别藻青蛋白（APC）三类。多发生橙色至红色荧光。

4.能量传递复合染料

免疫荧光用什么封闭比较好？

可以使用无蛋白封闭液 PW040 PW041 PW042，

血清封闭：组织切片上有剩余的位点可以与一抗非特异性结合，造成后续结果的假阳性；封闭血清一般是和二抗同一来源的，血清中动物自身的抗体，预先能和组织中有交叉反应的位点发生结合；也可以用小牛血清、BSA、羊血清等，但不能与一抗来源一致。

生化试剂的种类与等说明：

（1）免疫试剂包括抗体及抗血清、正常血清及补体、抗原、免疫组织化学研究用试剂、细胞培养用试剂、细胞分离试剂、凝胶内扩散法及电泳试剂等。

（2）基因工程用试剂包括基因表达与基因重组、人工合成蛋白、激素、核酸合成试剂、核酸制剂、内切酶等。

（3）诱变剂和致癌物质主要供测定工作场所与生活环境中的毒物质的致癌性与化学毒物的致突变性。

（4）工业用化学品包括试制开发的工业用化学品，有四千种以上，还在不断增加。