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质谱鉴定微生物的原理你知道吗
阅读次数:432 发布时间:2022/9/29 11:21:51
在应用MALDI-TOF MS时,通常将微生物样本与一种饱和的低分子量无机化合物溶液(称为基质)进行混合加在靶板上,待干后样本与基质共结晶后形成了以基质包裹构架的样本固体沉淀。样本基质结晶体经激光辐射,基质从激光中吸收能量使样品吸附,基质与样品之间发生电荷转移使得样品分子电离,离子在加速电场下获得相同的动能,经高压加速、聚焦后进入飞行时间检测器。
根据离子飞行时间的不同进行分析得出离子质荷比(m/z)和离子峰值,形成质量图谱。不同的微生物由于蛋白分子组成有差异而形成具有特异性的图谱,通过软件对数据库的比对进行微生物种或菌株的区分和鉴定。
质谱鉴定方法十分迅速,可以在数分钟内完成微生物鉴定,有研究显示MALDI-TOF MS与传统方法比较降低了实验室成本和出报告的时间,与传统方法所需的数小时相比是一个质的飞跃。此外,质谱操作简便,通量高,可以同时鉴定多个样本。通常质谱数据库是作为仪器的组成部分,由各自公司开发和维护,这一点有别于公共开放数据库。
质谱仪数据库的可扩展性对于进一步的鉴定分析非常重要,尤其是菌种间的区分和流行病学研究等。由于不同的平台都是在各自的系统中建立自身的数据库并且发展自身的软件、算法和评分标准,因此不同的质谱系统给出的数字信息不具备可比性。不同的质谱系统的比较要通过对微生物鉴定终结果的准确程度来实现。
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