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液体培养基如何接种？岑特为您解答

阅读次数：416 发布时间：2022/3/7 10:57:35

液体培养基接种是用接种环、移液器或吸管等工具，将菌体或菌液移至试管、三角瓶等容器中的液体培养基中的一种接种方法。其操作与面斜面接种基本相同，但应注意：液体培养基试管管口或三角瓶瓶口略向上以免培养液流出；加入菌体时，应使接种环与管内壁轻轻研磨，使菌体擦下，塞好棉塞后，将试管在手掌心中轻轻敲打或轻轻摇晃三角瓶，使菌体混合均匀。

试管液体接种
试管液体接种是将一定体积的样品混悬液加入到盛有指定液体培养基的试管内，或将一定体积、按标准规定条件下培养过的培养液接入盛有指定液体培养基的试管内（有时是指接种环取一环，或移液管移液器移取一定的体积，例如0.1ml、1ml等）。涉及试管液体接种的操作有MPN法检测大肠菌群/大肠杆菌，以及沙门氏菌、单增李斯特氏菌的二次增菌转接操作等。

此处以用移液器将一定体积的样品混悬液接入到盛有指定液体培养基的试管内为例，
①用酒精棉消毒操作台面。将移液器吸头盒放入酒精灯右侧，靠近酒精灯放置。将需要进行液体转接的试管插在试管架上，置于酒精灯左边左手附近。将移液器调至合适的刻度放于右手附近的架子上。废物缸放于右手能触及的范围内。
②点燃酒精灯，左手于酒精灯火焰附近打开移液器吸头盒，右手持移液器用力插取吸头两下以防吸头松动脱落，拔出移液器并盖上移液器吸头盒盒盖。左手取待转接液体试管，试管底部位于左手手心，移液器吸头和试管口应在酒精灯火焰周围的无菌区域之内。
③将试管伸向右手。右手食指，中指，无名指握住移液器，拇指靠在移液器按钮上，小指和掌心下缘合围夹住试管帽并用力拔出。如果操作者的手比较小，可以靠食指无名指和小指握住移液器，拇指仍靠在液体按钮上。而中指向外伸，靠中指内侧和食指、无名指外侧夹住试管帽。将试管口和移液器吸头靠近火焰，试管口灼烧一周，在火焰附近将吸头刚好伸入试管口，抵住试管内壁下侧，同时按住移液器按钮至一档（轻微推不动）。不要将移液器吸头伸到试管底部，而应倾斜试管使液面倾斜至试管口附近并没过吸头尖端。右手拇指缓慢松开，使液体缓缓吸入洗头，注意不要吸入空气。如果有空气吸入，必须将液体压回试管重新吸取。当右手拇指完全松开时，撤离移液器，注意吸头需尽量一直围绕在在酒精灯火焰附近，并且吸头务必保持向下姿势以防止液体倒流入移液器内部引起污染。
④吸完液体后，将移液器撤离试管，移液器吸头移到酒精灯火焰的远离操作者的一侧，将试管口在火焰上灼烧灭菌。
⑤灭菌后，右手小指迅速将试管帽盖上，此时移液器吸头仍然要在火焰形成的无菌区域内，不可离酒精灯火焰太远。盖上试管帽将试管归位。
⑥左手取待转接入液体的试管，右手保持移液器吸头在酒精灯火焰附近。
⑦右手保持握移液器姿势取下试管帽并灼烧管口。将吸头抵靠在试管口的内壁上，缓缓推动移液器按钮至底（完全推至第二档，使残存在吸头尖端的液体也流出）。推出液体时注意不要将吸头深入试管底部，也不要用力推导致液体飞溅。
⑧左手将试管口靠近火焰灭菌，移液器吸头移到酒精灯火焰的另一侧。再次灼烧试管口
⑨右手保持握移液器姿势将试管帽盖上，将试管归位。移取液体完毕后，按压移液器滑动杆使吸头脱落至废物缸，移液器放回架子。熄灭酒精灯，将台面消毒并收拾干净。

三角瓶液体接种
相对于试管的液体接种培养，三角瓶接种培养的优势在于通气效果好。多见于霉菌或一些细菌的复壮培养或者摇床培养等。操作与面提到的液体试管接种操作基本相同，后将液体加入三角瓶的时候，三角瓶倾斜，移液器吸头抵在三角瓶的内壁，缓缓将液体加入，避免喷溅和气泡