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WesternBlot有很多杂带的原因分析

阅读次数:434   发布时间:2022/2/22 10:13:10

1)目的蛋白有多个修饰位点,本身可以呈现多条带,建议查阅文献或进行生物信息学分析,获得蛋白序列的修饰位点信息,通过去修饰确定蛋白实际大小
2) 样本处理过程中目的蛋白发生降解,建议加入蛋白酶抑制剂;样本处理时在冰上操作
3)杂蛋白多,建议处理目的蛋白
4)抗体特异性不强,建议使用特异性强的抗体
5)抗体孵育时间过久,建议减少抗体孵育时间
6)二抗与抗原有交叉反应,建议选择合适的封闭物
7)二聚体或多聚体存在,建议增加蛋白质变性过程及强度
8)底物显色与曝光时间过长,建议缩短显色及曝光的时间

生化试剂的种类与等说明:
(1)免疫试剂包括抗体及抗血清、正常血清及补体、抗原、免疫组织化学研究用试剂、细胞培养用试剂、细胞分离试剂、凝胶内扩散法及电泳试剂等。
(2)基因工程用试剂包括基因表达与基因重组、人工合成蛋白、激素、核酸合成试剂、核酸制剂、内切酶等。
(3)诱变剂和致癌物质主要供测定工作场所与生活环境中的毒物质的致癌性与化学毒物的致突变性。
(4)临床诊断试剂主要供医疗系统中的临床病理诊断、生化诊断、液晶诊断、同位素诊断与一般化学诊断等诊断检查中所用的一大类化学试剂。
(5)工业用化学品包括试制开发的工业用化学品,有四千种以上,还在不断增加。

试剂管理窍门:
一般按用途可以分为通用试剂、高纯试剂、分析试剂、仪器分析试剂、临床诊断试剂、生化试剂、无机离子显色剂试剂等。有四种常用规格:
1.优纯或一品(GR 精密分析和科学研究工作);
2.分析纯或二品(AR 重要分析和一般研究工作);
3.化学纯或三品(CP 工矿及学校一般化学实验);
4.实验试剂(L.P.)。大多数的试剂具有一定的毒性及危险性。对科研试剂的加强管理,不仅是保证分析结果质量的需要,也是确保人民生命财产安全的需要。试剂应根据毒性、易燃性、腐蚀性和潮解性等不同的特点,以不同的方式妥善管理。保存注意事项:低温、避光、干燥阴凉处封闭贮存,严禁与有毒、有害物品混放、混运。本品为非危险品,可按一般化学品运输,轻搬动轻放,防止日晒、雨淋。
我们提供的试剂产品品质优良,都是通过严格的检测体系认证。
 

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