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血清汇总：那些可以忽略却重要的细节

阅读次数：442 发布时间：2021/12/6 11:14:02

在我们日常的细胞实验中，总会遇到各式各样的问题，其中关于胎牛血清（FBS）的问题多，天为大家汇总了血清一些常见问题，满满的干货！

那些可以忽略的小却重要的细节：

1. 血清的保存温度？

未拆封的血清应保存在-15℃至-20℃，避免反复冻融。拆封后的血清应无菌分装成适当的用量并存放于 -15 ℃ 至 -20 ℃，2~8 ℃ 溶解后建议一个月内使用。

2. 血清的有效期是多久？

大部分血清效期是 5 年，针对每个批次，请通过质检文件确定具体效期日期。

3. 血清应如何融解？

血清从冷冻箱取出后，置于2～8℃冰箱使之融解，不时规则地摇晃均匀，充分融解后分装或使用。

4. 为什么有时血清中出现沉淀？是否需要去除？如何去除？

血清中的白色沉淀主要是脂蛋白、冷凝集素、玻连蛋白、胎球蛋白、磷酸钙、胆固醇等、絮状沉淀物主要是纤维蛋白。多种原因可能导致血清中沉淀的形成，常见的原因是融化过程中，脂蛋白聚集所致。该现象一般不会影响产品质量。若需要去除这些絮状沉淀物，可以将血清分装至无菌离心管内，以400g 稍微离心,上清液即可接着加入培养基内一起过滤。我们不建议以过滤的方法去除这些絮状沉淀物，因为血清中的絮状物会阻塞过滤膜。

5. 血清是否需要做灭活处理？

血清是否需要灭活取决于您的应用。加热可以灭活补体系统。激活的补体参与溶解细胞事件，刺激平滑肌收缩，细胞和血小板释放组胺，激活淋巴细胞和巨噬细胞。在免疫学研究，培养ES 细胞，昆虫细胞和平滑肌细胞时，推荐使用热灭活血清。

灭活过程中，会导致血清中某些成分被破坏，如氨基酸，维生素，生长因子等。所以只有在您的实验对血清有特殊要求时，才会考虑对血清进行灭活处理。如您的实验对血清中的某种组分敏感，需要去除该组分。常见的情况是需要去除血清中的补体蛋白，因为补体在机体中参与细胞杀伤，巨噬细胞和淋巴细胞活化，肥大细胞和血小板组胺释放，平滑肌收缩等过程，所以一般在免疫学相关研究中及肌细胞和干细胞的培养过程中需要对血清进行灭活处理。

6. 如何进行血清灭活处理？

血清请先按上述「血清应如何融解」中的操作步骤融化和混匀，热灭活时请将血清置于 56 ℃ 水浴 30 分钟。为尽量减少热灭活对血清品质的影响，一次灭活的血清体积不宜过大。好准备同样的容器装相等体积的水（与血清相同温度），灭活时将装有血清和水的容器同时放入 56 ℃ 水浴, 在装水的容器中放置温度计，加热过程中不时轻轻旋转混匀血清，当温度计显示达到 56 ℃ 左右，开始计时。56 ℃ 水浴后，建议马上转移到冰上降温。