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蛋白、DNA、RNA的上样缓冲液区别

阅读次数：517 发布时间：2021/12/2 11:30:30

上样缓冲液即loading buffer，是蛋白质、核酸DNA与RNA的研究实验中溶解和添加样品时所用的一类上样缓冲液，蛋白质、DNA、RNA是不同的样品，其上样缓冲液也有所区别。

蛋白上样缓冲液的组成

其缓冲液主要采用Tris-HCl（三羟甲基氨基甲烷盐酸）或Tris甘氨酸、与EDTA盐（乙二胺四乙酸二钠），还需添加SDS，DTT（二硫苏糖醇），溴酚蓝，甘油等。

蛋白、DNA、RNA的上样缓冲液区别

SDS可与蛋白质结合使蛋白质-SDS复合物上带有大量的负电荷，这时蛋白质本身的电荷完全被SDS掩盖，消除了各种蛋白质本身电荷的差异；SDS还可以断开分子内和分子间的氢键，破坏蛋白质分子的二和三结构。DTT可以断开半胱氨酸残基之间的二硫键，破坏蛋白质结构，消除了蛋白结构之间的差异。终无电荷及结构上差异的蛋白（亚单位），电泳速度只是与其分子量大小有关。溴酚蓝用作电泳时的指示剂，可大概指示电泳结束的时间。

核酸上样缓冲液的组成

核酸包括DNA与RNA，其上样缓冲液主要含有Tris-HCl，以及染料二甲苯青FF、溴酚蓝（指示剂）等。指示剂溴酚蓝和二甲苯氰FF起到指示的作用是显示电泳的进程，以便我们适时终止电泳。DNA与RNA的上样缓冲液基本可以通用，它们的碱基基本一致，缓冲液中的染料都可与其碱基结合，跑出条带。不过，如果使用DNA上样缓冲液，里面会夹杂一些RNA酶，这些酶有可能会影响到实验结果，使用需要将RNA酶处理掉。

需注意的是，虽然DNA与RNA的上样缓冲液有时可以通用，但是它们与蛋白缓冲液是不能通用的。德晟是诊断试剂原料厂家，可提供蛋白与核酸研究相关的Tris、MOPS、CAPS等多种缓冲剂。