服务热线：021-58993001

主营产品：

ELISA试剂盒，质粒定制，动物血清，酶联免疫试剂盒，白介素试剂盒，标准品对照品，培养基，抗体，细胞株，微生物，染色液溶液，生化试剂，分子生物，实验耗材

公司新闻/NEWS

岑特生物分析：石蜡切片及染色过程

阅读次数：1750 发布时间：2018/8/7 15:48:11

石蜡切片及HE染色过程：

一、石蜡切片

1. 取材: 刀片要求锋利而薄,组织厚度约2—3mm, 大小1.5×1.5×0.2～0.3cm为宜. 取材时间越快越好.

2. 固定: 组织取下后应立即放入10%福尔马林（相当于4%甲醛）固定.

注意:

（1）. 固定液量应为组织块体积的40倍.
（2）固定时间固定时间与使用的固定液种类和组织块大小, 温度等有关. 一般为3—24h.

（3）固定温度大多可在室温固定, 在低温（4℃）时间应延长.

（4）固定容器应大些.

3. 漂洗: 流水冲洗2—10h.

4. 脱水: 从低浓度酒精到高浓度酒精.

70%（数分钟）→80%（60-120’）→90%（60-120’）→95%（60-120’）→95%（60-120’）→100%（60-120’）→100%（60-120’）.

5. 透明: 组织块脱水后必须经过一种既能与酒精混合又能溶解石蜡的溶剂, 而使石蜡进入组织块. 常用二甲苯, 一般浸泡30m即可.

6. 浸蜡: 组织经透明后在熔化的石蜡内浸渍的过程称浸蜡. 一般需经2—3次浸渍才能完成, 总时间为3—4h. 用于浸蜡的石蜡熔点为52—56℃.

7. 包埋: 先将熔化的石蜡倒入包埋框再用加热的镊子将组织块放入. 包埋面必须平整. 包埋后石蜡稍凝后可移入冷水或冰箱中加速凝固.

8. 切片: 修块→切片→展片→捞片→烤片.

二、 HE染色
1. 染色前切片处理

（1）脱福尔马林色素.

（2）脱汞盐结晶.

（3）脱黑色素.

2. 染色步骤

二甲苯脱蜡（10’）→ 无水乙醇洗去二甲苯（1’×2次）→95%酒精（1’）→90%酒精（1’）→85%酒精（1’）→自来水洗（2’）→苏木精染色（1—5’）→自来水洗（1’）→1%盐酸酒精分化20s→自来水洗（1’）→稀氨水（1%）反蓝30s→自来水或蒸馏水洗（1’）→伊红染色（20s—5min）→自来水洗（30s）→85%酒精脱水（20s）→90%酒精脱水（30s）→95%酒精（1’）→95%酒精（1’）→100%酒精（2’）→100%酒精（2’）→二甲苯（2’）→中性树胶封片.

3. 染色结果: 细胞核呈兰色, 胞浆呈红色.

三、盐酸酒精的配制

浓盐酸0.5—1ml + 75%酒精99ml.

此液用一段时间后需延长或更换液体, 新液体分化时间要短.