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技术文章/ARTICLE

岑特实验：常用电泳法介绍

点击次数：233 发布时间：2022/6/16 13:15:54

1、醋酸纤维素薄膜电泳（电泳法测定）

醋酸纤维素是提纤维素的羟基乙酰化形成的纤维素醋酸酯。由该物质制成的薄膜称为醋酸纤维素薄膜。电泳时经过膜的预处理、加样、电泳、染色、脱色与透明即可得到满意的分离效果。此电泳特点是分离速度快、电泳时间短、样品用量少。因此特别适合于病理情况下微量异常蛋白的检测。

2、纸电泳

纸电泳（PE）是指用滤纸作为支持载体的电泳方法。是zui早使用的区带电泳，由于操作简单方便，因此在很多域得以广泛应用。比如，分离、确定某些蛋白质，如糖蛋白、脂蛋白等，尤其是在分离氨基酸的混合物时，PE是一种很有价值的分析技术。在这种平卧式滤纸电泳装置（见图6-2）中，将滤纸条水平地架设在两个装有缓冲溶液的容器之间，样品点于滤纸中央。当滤纸条被缓冲液润湿后，再盖上绝缘密封罩，即可由电泳电源输入直流电压（100V～1000Ｖ）进行电泳。

3、凝胶电泳

由区带电泳中派生出一种用凝胶物质作支持物进行电泳的方式，被称为凝胶电泳。因此，该凝胶适合于免疫复合物、核酸与核蛋白的分离、鉴定及纯化。在临床生化检验中常用于LDH、CK等同工酶的检测。

4、等电聚焦电泳

等电聚焦电泳是20世纪60年代中期问世的，一种利用有pH值梯度的介质，分离等电点不同的蛋白质的电泳技术。因为这种电泳方法具有很高的分辨率，所以在等电点上只要有0.01pH单位的差异就能被满意地分离。因此，特别适合于分离分子量相近而等电点不同的蛋白质组分。

等电聚焦电泳法的特点:

①使用两性载体电解质，在电之间形成稳定、连续、线性的pH梯度;

②由于“聚焦效应”，即使很小的样品也能获得清晰、鲜明的区带界面;

③电泳速度快;

④分辨率高;

⑤加入样品的位置可任意选择;

⑥可用于测定蛋白质类物质的等电点;

⑦适用于中、大分子量（如蛋白质、肽类、同工酶等）生物组分的分离分析。

5、等速电泳

等速电泳（CITP）是一种“移动界面”电泳技术。是电泳中惟一的分离组份与电解质一起向移动，同时进行分离的电泳方法。同等电聚焦电泳一样，等速电泳在毛细管中的电渗流为零，它采用两种不同浓度的电解质组成，一种为导电解质，充满整个毛细管柱；另一种为尾随电解质，置于一端的电泳槽中。图6-3是阴离子等速电泳示意图。CITP适用于小离子、小分子、肽类及蛋白质的分离。

6 、双向凝胶电泳（二维电泳）

双向凝胶电泳（two-dimensional gel electrophoresis, 2-DE）技术又称二维凝胶电泳技术，是目常用的*一种能够连续地在一块胶上分离数千种蛋白质的方法，*向采用等电聚集电泳。第二向采用了十二烷基硫酸钠一聚丙烯酰胺凝胶电泳。广泛应用于生物学研究的各个域，其原理是将高分辨率的等电聚集电泳和SDS-PAGE电泳联合组成双向电泳。

7、免疫电泳

免役电泳是电泳分析与沉淀反应的结合产物。该技术有两大优点：一是加快了沉淀反应的速度，二是将某些蛋白组分跟据其带电荷的不同而将其分开，再与抗体起反应，从而使本法更为微量化、多样化。因此，其应用范围日益扩大。

该方法可以用来研究：

①抗原和抗体的相对应性；

②测定样品的各成分以及它们的电泳迁移率；

③根据蛋白质的电泳迁移率，免疫特性及其它特性，可以确定该复合物中含有某种蛋白质；

④鉴定抗原或抗体的纯度。

原创作者：上海岑特生物科技有限公司