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技术文章/ARTICLE

细胞培养基常见成分及作用功能介绍

点击次数：410 发布时间：2022/6/8 13:14:06

能量来源

每一个生长培养基都需要碳源，以供细胞新陈代谢。碳源通常是葡萄糖，但也可以是其他糖类，如半乳糖、己糖、果糖或其他碳源(如丙酮酸，谷氨酰胺)。葡萄糖通常以终浓度为5.5 mM的含量添加，大约等于人体血液中的葡萄糖水平。然而，你可以购买葡萄糖浓度变化范围很广的培养基来满足你的具体需求。你甚至可以购买不含葡萄糖的培养基，然后自己定制浓度，模拟高糖的糖尿病状况，或者研究低糖应激反应。

缓冲液

细胞需要一种特殊的pH值从7.2到7.4，否则它们无法好地发挥细胞功能，以供生长和存活。在二氧化碳含量较高的培养器中，二氧化碳与水发生反应，产生氢离子，使培养基酸化。为了中和二氧化碳产生的酸度，并在培养基中保持佳pH值，大多数培养基都使用化学缓冲系统。然而，一些缓冲方法会干扰细胞生长。

哺乳动物细胞常见的缓冲系统是碳酸氢钠，生物影响小。碳酸氢钠与氢离子反应生成二氧化碳，隔离它们以保持pH值。然而，碳酸氢钠的一个缺点是，它在生理pH值上不是佳的缓冲效果。为了避免这个问题,研究人员经常使用替代品，如HEPES，增加某些培养基类型的缓冲能力。

酚红

由于维持pH值对细胞培养至关重要，许多培养基配方包括一种名为酚红的pH指示剂，其在酸性条件下变黄(< 6.8)，在基本条件下呈粉红色(> 8.2)。虽然通常不是问题，但酚红可以模拟雌激素，因此，当培养表达雌激素受体的细胞类型时，通常被排除在外。没有酚红的培养基可以用于比色测定，如MTT细胞增殖实验，苯/酚的色谱可能会干扰光谱光度测量的读数，从而使结果混淆。

血清

对许多培养体系来说，一个重要组成部分是血清，通常是胎牛血清，称为FBS。血清来自于血液，是糖、盐、脂类、生长因子等许多成分的混合物。由于它的生物来源，很难维持再生性，因为每一批血清都是独1无二的。为了规避这一问题，一些实验室使用化学定义的血清替换物，一些实验室则购买一整批次的特定的血清，以确保一致的结果。

代谢物，维生素和矿物质

DMEM的成分列表主要分为三大类：氨基酸、维生素/辅因子和无机盐(包括钙和镁)。许多这些成分在所有细胞培养基中都是常见的，而精确的组合和浓度已经对细胞生长进行了优化。尽管如此，许多实验室还是选择用额外的非必需氨基酸补充他们的培养基，以防止细胞使用葡萄糖或谷氨酰胺来合成。此外，一些公司生产无镁和钙的培养基用于特定的研究，选择时请仔细查看。

抗生素

很多实验室都在他们的细胞培养中加入抗生素，以防止不需要的细菌或真菌的生长，即使是无菌工作。常用的抗菌补充剂是青霉素和链霉素(pen / strep)的组合，在完整细胞培养基中，终浓度为青霉素50-100 IU/ mL和链霉素50 -100 g/ mL。然而，一些实验室选择不使用抗生素，因为抗生素会对细胞产生不必要的影响，或者可以掩盖低水平的细菌污染。根据需要，你可以决定是否在培养基中使用抗生素。

原创作者：上海岑特生物科技有限公司