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如何更加准确的测定培养基的pH值?

点击次数:320   发布时间:2022/4/6 10:11:27

大多数的培养基的配方都是依据标准来做的,例如国家标准、药典或者其他的国外标准。这些标准对培养基的pH值都有严格要求,一般都是控制在一个很小的范围。所以pH值对于培养基厂家的质量控制以及客户对培养基的验收,都是很重要的。

校准

先在测量pH值时,我们都会对pH计进行一个校准工作,它的校准准确率对后续的测量有很大影响。pH电需要有规律的进行校准。每天至少校准一次,是恰当的。

由于每支电都有其特征性的零点和斜率,为了得到可靠和精确的结果,少两点校准是必不可少的。当要测量大范围的pH值时,则需要进行至少3点校准。大多数的pH仪表可以进行3-5点校准。

同时所测量的样品pH值落在所选择标准液范围之内也是非常重要的。

在电进行校准时,好等待缓冲液温度在标示温度下校准,这样测出的pH值才是缓冲液标示的值,比如pH 6.86和pH9.12的缓冲液是表示25℃下的pH值,那么你在20℃进行校准,显示的就不是6.86或者9.12。不过一般厂家都会附送一张缓冲液在不同温度下测的pH值,下图可以参考下。

标准pH计缓冲溶液对照表

用于校准的缓冲液是非常精确的溶液,拥有固定的数值和精度。缓冲液瓶开封后,为了保证校准的准确性,要注意下面事项:

1. 次使用缓冲液时,在包装上标明日期,保证缓冲液包装的密封性。

2. 不要把使用过的缓冲液倒回原瓶,或把不同厂家的缓冲液混合在一起。

3. 常温下储存缓冲液,储存时避免阳光直射

4. 校准请清洗电,不要在原瓶中直接校准

5. 绝对不要使用过期的或污染的缓冲液

6. 缓冲液到期应及时更换新的缓冲液

培养基pH值的测量

培养基按形态可以分为固体培养基和液体培养基。液体培养基可以选择普通液体的pH电,固体培养基选择对应的固体pH电,比如针对凝胶表面的平头电。如果固体培养基用液体的pH电测量,得出的结果是没有参考价值的。

先在配置培养基的过程中,一定要注意配制用水一般用蒸馏水或者去离子水。否则可能对之后的pH值有影响。

其次,按照培养基厂家使用说明配置灭菌。一般培养基外包装标签上的pH标识表示灭菌后25℃测的pH值,所以液体培养基要待溶液温度达到25℃时测量培养基的pH值,固体培养基等其凝固后再用用的固体pH电测量,同时测量的温度也要在25度。

这里有些人可能会说我们的pH计有自动温补功能,是不是可以不用等到25度就可以测量?

这里需要注意的是自动温补功能只能补偿电本身,并不能补充待测溶液的温度,所以培养基标准要求在25℃测量,那待测培养基溶液温度就要控制在25℃左右再测。

维护

每次测量后用去离子水冲洗电,切勿用纸擦拭电。纸张粗糙的表面会刮划并损坏pH敏感玻璃上的凝胶层,并且会在电上产生静电电荷。静电电荷会导致测量信号非常不稳定。

测量间隙或电短时不用,电需要储存在盛有用的电储存液,或电解液(如:3mol/L KCl)或缓冲液pH4或pH7的容器中。确保容器中电解液液面低于电中填充液的液面。

原创作者:上海岑特生物科技有限公司

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