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动物细胞培养的培养步骤介绍
点击次数:167 发布时间:2023/10/16 11:33:00
动物细胞培养的必需条件
在所有的细胞离体培养中,困难的是动物细胞培养。下面是它所需要的特殊条件。
⑴血清:动物细胞离体培养常常需要血清。常用的是小牛血清。血清提供生长必需因子,如激素、微量元素、矿物质和脂肪。在这里,血清等于是动物细胞离体培养的天然营养液。
⑵支持物:大多数动物细胞有贴壁生长的习惯。离体培养常用玻璃,塑料等作为支持物。
⑶气体交换:二氧化碳和氧气的比例要在细胞培养过程中不断进行调节,不断维持所需要的气体条件。
动物细胞培养的培养步骤
注:所有步骤应在无菌无毒的超净工作台进行。胰蛋白酶处理时间不宜过长。
取离体的动物组织,器官或细胞,剪碎并加入胰蛋白酶分解成单个细胞,配置形成细胞悬液。
制备动物细胞培养液体培养基(需加入血清,保/证无菌无毒),将细胞接种至培养基,放入二氧化碳培养箱中进行初代培养。
当细胞增殖达到一定程度,出现接触抑制现象时,用胰蛋白酶再次处理,并用细胞悬液吹打贴壁生长的细胞。进行细胞计数。
依照计数结果,分瓶培养,进行传代培养。获得细胞系或细胞株。
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