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技术文章/ARTICLE

灭菌后小倒管内留有气泡咋办呢？

点击次数：680 发布时间：2021/1/26 9:31:40

大肠菌群、大肠杆菌检测时，所用培养基LST、BGLB、EC肉汤等这些需要用小倒管（杜氏管）考察产气的培养基，灭菌后，偶尔会有小气泡留在小倒管内，导致培养基不能使用。重复灭菌不仅费时，更重要的是会破坏培养基的有效成分。为了避免这类问题的发生，根据实验经验，做出以下几种可能原因分析：

原因：高温高压灭菌锅工作压力不够，使气体不能完全排出
高压锅在灭菌过程中产生的大压力不够，不能将小倒管内的气体挤出，导致灭菌后任留有小气泡。此外，高温高压灭菌锅若是温度上升缓慢或者达不到灭菌温度，也会出现类似现象。
解决办法：使用检查灭菌效果的用品－压力蒸汽灭菌指示卡，对高温高压灭菌锅的灭菌情况进行监测。

原因二：试管塞塞得太紧
在灭菌时，试管塞塞得太紧（有些硅胶塞与试管不配套）会导致试管内压力与灭菌锅内压力不致。当灭菌锅升温升压时，锅内压力会大于试管内压力，试管内压力不够，不能将小倒管内气体排尽，就留有气泡；当灭菌锅降温降压时，锅内压力小于管内压力，可能会使试管塞和培养基崩出，培养基报废。
解决办法：改用塑料帽、不锈钢管帽，或者与试管相匹配的硅胶塞。

原因三：小倒管口太小
小倒管在加热加压后，方面液体培养基要进入小倒管，另方面小倒管内部的空气要被排出，如果小倒管管口太小，液体不容易进去，里面的空气不容易被排出，就会导致有小气泡生成。
解决办法：改用开口比较大的倒管。

以上提供几种可能形成气泡的主要原因，还有几点建议：
1.可以在高压锅压力降下来后，温度不太高的时候将培养基从锅中拿出，迅速放在冷水中，急冷，注意要使冷水高度超过试管中液面高度。利用热胀冷缩的原理，可以使小倒管中气泡排出。
2.若使用非全自动高温高压灭菌锅（此类锅般需要在100℃手动关闭放气阀），则不要在锅刚达到100℃时就关闭放气阀，可以让高压锅在100℃时多排会儿热气，这样有助于小倒管中气体排出。
此外，尽量不要采用将灭菌后的试管颠倒或大角度倾斜的方式，使小倒管内气体排出。此种方法可能会导致培养基通过试管口或试管塞受到污染，或者导致试管内液体流出。

原创作者：上海岑特生物科技有限公司