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液体培养基接种方法一览
点击次数：210 发布时间：2023/4/14 10:34:21
液体培养基接种是用接种环、移液器或吸管等工具，将菌体或菌液移至试管、三角瓶等容器中的液体培养基中的一种接种方法。其操作与面斜面接种基本相同，但应注意：液体培养基试管管口或三角瓶瓶口略向上以免培养液流出；加入菌体时，应使接种环与管内壁轻轻研磨，使菌体擦下，塞好棉塞后，将试管在手掌心中轻轻敲打或轻轻摇晃三角瓶，使菌体混合均匀。
试管液体接种
试管液体接种是将一定体积的样品混悬液加入到盛有指/定液体培养基的试管内，或将一定体积、按标准规定条件下培养过的培养液接入盛有指/定液体培养基的试管内（有时是指接种环取一环，或移液管移液器移取一定的体积，例如0.1ml、1ml等）。涉及试管液体接种的操作有MPN法检测大肠菌群/大肠杆菌，以及沙门氏菌、单增李斯特氏菌的二次增菌转接操作等。
此处以用移液器将一定体积的样品混悬液接入到盛有指/定液体培养基的试管内为例，
①用酒精棉消毒操作台面。将移液器吸头盒放入酒精灯右侧，靠近酒精灯放置。将需要进行液体转接的试管插在试管架上，置于酒精灯左边左手附近。将移液器调至合适的刻度放于右手附近的架子上。废物缸放于右手能触及的范围内。
②点燃酒精灯，左手于酒精灯火焰附近打开移液器吸头盒，右手持移液器用力插取吸头两下以防吸头松动脱落，拔出移液器并盖上移液器吸头盒盒盖。左手取待转接液体试管，试管底部位于左手手心，移液器吸头和试管口应在酒精灯火焰周围的无菌区域之内。
③将试管伸向右手。右手食指，中指，无名指握住移液器，拇指靠在移液器按钮上，小指和掌心下缘合围夹住试管帽并用力拔出。如果操作者的手比较小，可以靠食指无名指和小指握住移液器，拇指仍靠在液体按钮上。而中指向外伸，靠中指内侧和食指、无名指外侧夹住试管帽。将试管口和移液器吸头靠近火焰，试管口灼烧一周，在火焰附近将吸头刚好伸入试管口，抵住试管内壁下侧，同时按住移液器按钮至一档（轻微推不动）。不要将移液器吸头伸到试管底部，而应倾斜试管使液面倾斜至试管口附近并没过吸头尖端。右手拇指缓慢松开，使液体缓缓吸入洗头，注意不要吸入空气。如果有空气吸入，必须将液体压回试管重新吸取。当右手拇指完/全松开时，撤离移液器，注意吸头需尽量一直围绕在在酒精灯火焰附近，并且吸头务必保持向下姿势以防止液体倒流入移液器内部引起污染。
④吸完液体后，将移液器撤离试管，移液器吸头移到酒精灯火焰的远离操作者的一侧，将试管口在火焰上灼烧灭菌。
⑤灭菌后，右手小指迅速将试管帽盖上，此时移液器吸头仍然要在火焰形成的无菌区域内，不可离酒精灯火焰太远。盖上试管帽将试管归位。
⑥左手取待转接入液体的试管，右手保持移液器吸头在酒精灯火焰附近。
⑦右手保持握移液器姿势取下试管帽并灼烧管口。将吸头抵靠在试管口的内壁上，缓缓推动移液器按钮至底（完/全推至第二档，使残存在吸头尖端的液体也流出）。推出液体时注意不要将吸头深入试管底部，也不要用力推导致液体飞溅。
⑧左手将试管口靠近火焰灭菌，移液器吸头移到酒精灯火焰的另一侧。再次灼烧试管口
⑨右手保持握移液器姿势将试管帽盖上，将试管归位。移取液体完毕后，按压移液器滑动杆使吸头脱落至废物缸，移液器放回架子。熄灭酒精灯，将台面消毒并收拾干净。
三角瓶液体接种
相对于试管的液体接种培养，三角瓶接种培养的优势在于通气效果好。多见于霉菌或一些细菌的复壮培养或者摇床培养等。操作与面提到的液体试管接种操作基本相同，/后将液体加入三角瓶的时候，三角瓶倾斜，移液器吸头抵在三角瓶的内壁，缓缓将液体加入，避免喷溅和气泡
原创作者：上海岑特生物科技有限公司
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