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岑特生物:荧光抗体染色中有几种方法呢?
点击次数:525 发布时间:2020/5/20 14:06:15
荧光抗体染色中有几种方法呢?为了帮助更多科研学子的了解,小编为大家搜集整理如下:
(一)荧光抗体染色结果判断:在每次实验时均需设立实验对照(阳性和阴性对照)。阳性细胞的显色分布有胞质型、胞核型和膜表面型三种类型。临床上根据特异性荧光强度达“+”(为荧光较弱但清楚可见)以上判定为阳性。
(二)双标记法:FITC及罗丹明分别标记不同的抗体,而对同一标本做荧光染色。
(三)间接法:可用于检测抗原和抗体,普通一抗+荧光二抗。灵敏度高,仅需一种荧光抗体。
(四)直接法:用特异荧光抗体直接滴加于标本上。本法操作简便,特异性高,非特异荧光染色因素少;缺点是敏感度偏低,需制备特异性的荧光抗体。
试剂注意事项:
①试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。
②实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。
③使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器。
④加入试剂的顺序一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。
⑤按说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
生物试剂的使用常识:
(1)试剂切忌与手接触(有些试剂有强腐蚀性、等特性)。
(2)要用洁净的药勺,量筒或滴管取用试剂,绝对不允许用同一种工具同时连续取用多种试剂。取完一种试剂后,应将工具洗净(药勺要擦干)后,才可取用另一种试剂。
(3)试剂取用后一定要将瓶塞盖紧,不可放错瓶盖和滴管,绝不允许张冠李戴,用完后请及时将瓶放回原处,以免遗忘,带来不便。
(4)已取出的试剂不能再放回原试剂瓶内(怕产生原试剂的再次污染)。
以上是小编为大家整理的内容,希望对大家有所帮助!更多信息资料可以咨询咱们客服哟~
原创作者:上海岑特生物科技有限公司
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