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岑特分析:血清使用时一定要热灭活吗?
点击次数:473 发布时间:2020/5/6 11:00:31
实验显现,通过正确处理的热灭活血清,对大多数的细胞而言是不需要的。经此处理过的血清对细胞的成长只有细小的促进,或彻底没有任何效果,乃至一般因为高温处理影响了血清的质量,而造成细胞成长速率的下降。
如果培养的细胞用于免疫学试验;培养ES细胞、平滑肌细胞时,推荐使用热灭活血清。
胎牛血清采自5-8个月胎龄的牛胚血,此时牛胚胎还未形成完整的补体系统;并且胎牛未接触微生物等病原成分,补体、抗体成分也很少,不会干预免疫试验。
同时热灭活会造成血清中生长因子、氨基酸、维生素等营养成分的损失,同时非常容易造成沉淀物增多。所以血清若非必要,无需做热灭活。
若必须做血清的热灭活,请遵守40℃,20分钟的原则,并且随时摇晃均匀。温度过高,时间过久或摇晃不均匀,都会造成沉淀物的增多。
而通过热处理的血清,沉淀物的构成会显著的增多,这些沉淀物在倒置显微镜下调查,像是小黑点,常常会让研究者误以为是血清遭受污染,而把血清放在37℃环境中,又会使此沉淀物更增多,使研究者误认为是微生物的分裂扩增。若非必须,能够不需要做热处理这一步。不但节省时间,更保证血清的质量!
在此,我们解析血清的质量标准:
1. 牛血清必须来自有文件证明无牛海绵状脑病的牛群或国家。并应具备恰当的监测体系。
2. 证明所用牛血清中不含对所出产疫苗的抑制物。
3. 有些国家还要求牛血清来自未用过反刍动物蛋白饲料的牛群。
4. 无细菌、霉菌、支原体的污染,有些国家要求无细菌噬菌体污染。
5. 对细胞有良好的支持繁衍效果。
6. 血清要通过滤膜过滤除菌,保证无菌。
如果培养的细胞用于免疫学试验;培养ES细胞、平滑肌细胞时,推荐使用热灭活血清。
胎牛血清采自5-8个月胎龄的牛胚血,此时牛胚胎还未形成完整的补体系统;并且胎牛未接触微生物等病原成分,补体、抗体成分也很少,不会干预免疫试验。
同时热灭活会造成血清中生长因子、氨基酸、维生素等营养成分的损失,同时非常容易造成沉淀物增多。所以血清若非必要,无需做热灭活。
若必须做血清的热灭活,请遵守40℃,20分钟的原则,并且随时摇晃均匀。温度过高,时间过久或摇晃不均匀,都会造成沉淀物的增多。
而通过热处理的血清,沉淀物的构成会显著的增多,这些沉淀物在倒置显微镜下调查,像是小黑点,常常会让研究者误以为是血清遭受污染,而把血清放在37℃环境中,又会使此沉淀物更增多,使研究者误认为是微生物的分裂扩增。若非必须,能够不需要做热处理这一步。不但节省时间,更保证血清的质量!
在此,我们解析血清的质量标准:
1. 牛血清必须来自有文件证明无牛海绵状脑病的牛群或国家。并应具备恰当的监测体系。
2. 证明所用牛血清中不含对所出产疫苗的抑制物。
3. 有些国家还要求牛血清来自未用过反刍动物蛋白饲料的牛群。
4. 无细菌、霉菌、支原体的污染,有些国家要求无细菌噬菌体污染。
5. 对细胞有良好的支持繁衍效果。
6. 血清要通过滤膜过滤除菌,保证无菌。
原创作者:上海岑特生物科技有限公司
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