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培养皿高压蒸汽灭菌的方法教程

点击次数：236 发布时间：2023/2/28 10:52:22

培养皿初由在德国生物学家罗伯特·科赫手下工作的细菌学家朱利斯·理查德·佩特里于1887年设计，故又称为“佩特里皿”。培养皿质地脆弱、易碎，故在清洗及拿放时应小心谨慎、轻拿轻放。使用完毕的培养皿比较好及时清洗干净，存放在安全、固定的位置，防止损坏、摔坏。

一、培养皿如何灭菌

1、加水：将高压蒸汽灭菌锅的内层锅取出，再往外层锅中加入适量的水，比较好水位是使水的平面与锅内三角搁架相平。

2、装锅：放回内层锅，并将培养皿放入锅内。

3、加盖：将锅盖上用于排气的软管插入到内层锅的排气槽中。再以两两相对的方式同时扭紧相对应的两个螺栓，使螺栓的松紧一致，勿使漏气。

4、加热与排气：打开放气阀，然后接通电源开始进行加热，直到锅内的水沸腾并且有大量的水蒸汽从放气阀冒出时，维持3-5分钟使锅内的冷空气全部排出。等到冷空气完/全排尽以后，再将放气阀关闭，让灭菌锅内的温度随着蒸汽压力的增加而逐渐上升。

5、保温保压：当锅内压力升到所需压力值之后，控制热源，维持所需压力值直到所需时间。

6、出锅：灭菌所需的时间到后，关闭灭菌锅电源，等待锅内的温度自然下降，直到压力表的数值降到"0"之后，才可以将灭菌锅的放气阀打开，将螺栓钮松并打开灭菌锅的盖子，取出培养皿。

7、保养：灭菌完毕后，将灭菌锅内剩下的水倒出，保持锅的内壁及内胆干燥，并将灭菌锅的锅盖盖好。

二、培养皿灭菌温度与时间

高压蒸汽灭菌适合于耐高温培养基、接种器械和蒸馏水的灭菌。培养基在爱制备过程中混入各种杂菌，分装后应立即灭菌，至少应在24h内完成灭菌工作。灭菌时一般是在0.105MPa压力下，温度121℃时，灭菌15~30min即可。

三、培养皿灭菌为什么要用报纸包裹

在制作培养基时，用报纸包裹培养皿，主要是保护培养皿不受损伤，因为制作时会出现一些情况，所以要用旧报纸包裹培养皿也不会，在后加入高压蒸汽灭菌锅。

原创作者：上海岑特生物科技有限公司