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细胞培养为什么要先裂解红细胞?
点击次数:371 发布时间:2022/12/13 10:00:11
红细胞裂解液
一、基本介绍
红细胞裂解液是一种去除红细胞简便易行的方法,即用裂解液裂解红细胞,它 既不损伤有核细胞又能充分的去除红细胞。裂解液裂解是一种比较温和的红细胞去除 方法,主要用于经酶消化分散的组织细胞的分离纯化,淋巴细胞的分离纯化以及组织细 胞蛋白与核酸提取等实验中红细胞的去除。经红细胞裂解液裂解得到的组织细胞中不 含红细胞,可进一步用于原代培养、细胞融合、流式细胞分析、核酸与蛋白的分离和 提取等。
二、使用说明
①组织细胞样品
1、新鲜组织经胰酶或胶原酶等消化分散成单个细胞悬液,离心弃去上清液。
2、从4℃冰箱中取出 ELS裂解液,按 1:3-5 的比例向细胞沉淀中加入ELS裂解液(1ml 细胞压积加入 3-5ml裂解液),轻轻吹打混匀。
3、 800-1000rpm离心 5-8 分钟,离心弃去上层红色清液。
4、收集沉淀部分,加入Hank’s液或无血清培养液离心洗 2-3 次。
5、如裂解不完/全可重复步骤2和3。
6、重悬细胞,用于后续实验;如提取RNA,/好是于步骤4开始使用DEPC水配制 的溶液中进行
红细胞的生命周期非常短,一般只有120天,但是他繁殖的血特别快,用他的话就会特别的能体现细胞的分裂,然后他是所有细胞中分裂快的所以这个细胞他是非常的有有价值的,所以对于细胞培养他非常的有用。就是它的构造非常简单,里面没有任何的细胞器,只有细胞膜跟蛋白质。
原创作者:上海岑特生物科技有限公司
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